組織 DNA提取試劑盒

一、樣本預處理：1.取5~10 mg動物組織，在研缽中加入液氮充分碾磨。2.將研磨好的粉末迅速轉(zhuǎn)移到預先裝有300 μL裂解液1和20 μL蛋白酶K的離心管中.注：如使用組織研磨儀鋼珠研磨，可在研磨后將300 μL裂解液1和20 μL蛋白酶K加入到研磨管中。3.在65°C下，震蕩（900~1200 rpm）孵育10min。。注: 樣本消化完成后，如果有組織碎片，建議12,000 rpm離心1 min去除殘留雜質(zhì)。注：如果需要去除RNA，加入5-10 μL RNA酶，室溫放置10 min。二、32通道全自動提取儀上機提取流程：1.轉(zhuǎn)移300 μL上清至96孔樣品板中裝有結(jié)合液2的第1/7列。2.將96孔板置于核酸提取儀中。3.將磁棒套推入磁棒套卡槽內(nèi)。4.啟動“組織DNA提取"程序，開始提取。5.程序結(jié)束后，核酸位于第6/12列的洗脫液7中，可用于后續(xù)實驗。三、Chemagic 360自動化流程預處理：1.上機前應(yīng)先檢查緩沖液容器中是否都含有足夠的緩沖液。2.點擊應(yīng)用程序，啟動后，等待機器自檢。3.自檢完成后，選擇程序“prime manifolds H96 all 360 V150116.che"，開始預填充管路。上機提取：1.轉(zhuǎn)移300 μL上清至96孔板中。2.板位1：在磁棒套架上放入磁棒套。3.板位2：放入裝有上清液的96孔板，加入500 μL結(jié)合液2。4.板位3：在96孔板中加入700 μL洗滌液3和20 μL磁珠懸浮液。5.板位4：在96孔板中加入700 μL洗滌液4。6.板位5：在96孔板中加入700 μL洗滌液5。7.板位6：在96孔板中加入700 μL洗滌液6。8.板位7：在96孔板中加入100 µL洗脫液7。9.選擇程序“chemagic-B DNA Tissue 360 H96 drying prefilling VD241225"，然后選擇需要上機的列數(shù)，點擊[Start]。10.提取完成后，核酸位于洗脫液板內(nèi)，可用于后續(xù)實驗或-80℃以下儲存。